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厭氧培養(yǎng)是啥原理

更新時間:2023-01-17      點擊次數(shù):2385
  一、厭氧培養(yǎng)(anaerobicculture)指把微生物置于與分子態(tài)氧隔絕狀態(tài)下所進(jìn)行的培養(yǎng),適用于兼性厭氧菌和專性厭氧菌。
 
  二、特點分類:
 
  (1)與空氣隔絕或盡量少接觸空氣的培養(yǎng)法:在三角瓶瓶頸以下裝滿液體培養(yǎng)基,通過煮沸把溶解的空氣趕出后,立即冷卻進(jìn)行細(xì)菌接種。由于發(fā)酵而產(chǎn)生H2和CO2時,就可進(jìn)一步確認(rèn)是厭氧細(xì)菌。另外,把瓊脂培養(yǎng)基加入普通試管約10厘米高度進(jìn)行穿刺培養(yǎng),或移植于液體培養(yǎng)基和固體斜面培養(yǎng)基上以后,再加一層液體石臘或礦物油,用這些方法可防止與空氣接觸。
 
  (2)除掉空氣的方法:把微生物裝入耐壓容器中進(jìn)行真空培養(yǎng),或充滿二氧化碳、氫氣、氮氣、氬氣等。這些氣體可把事先混入的微量氧氣除掉。在氫存在時,可用置換后飛濺火花等方法來除掉殘存的氧氣。
 
  (3)去氧的方法:使用堿性鄰苯三酚(pyrogallol)、黃磷、金屬鉻和稀硫酸進(jìn)行化學(xué)除氧,或使用好氧細(xì)菌及發(fā)芽的種子,使通過呼吸而消耗掉氧氣。
 
  三、組成構(gòu)造:
 
  (1)厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內(nèi)在半小時內(nèi)造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達(dá)厭氧狀態(tài),可以孵育。
 
  (2)厭氧手套箱(Anaerobieglovebox)是迄今為止的培養(yǎng)厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內(nèi)進(jìn)行操作,故名。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著。
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